酶标抗体效价测定程序

作者:李成文(原北京军事医学科学院主任)

各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下:

如羊抗鼠IgG-HRP的效价测定

抗原包板:15μg/ml小鼠IgG-pH9.6·CB

             

37℃包被60min或4℃过夜

                     ↓

PBST洗板3次,5min/次

                     ↓

加入倍比稀释的HRP标记抗体

                     ↓

37℃ 30min

                     ↓

PBST洗板5min/×3

                     ↓

底物液0.1ml/37℃ 510min

                     ↓

终止液:2N H2SO4   0.05ml/

                     ↓

OD450nm测定OD

阳性OD450nm值,比对照值大3倍孔,为判断效价稀释度。