实验室常用贮存液的配制(2)

作者:李成文(原北京军事医学科学院主任)

实验室常用贮存液的配制(2)

10 2.5mol/L CaCl2 溶液

【配制方法】在 20ml 蒸馏水中溶解 13.5g CaCl2?6H2O ,用 0.22 μ m 滤器过滤除菌,分装成 1ml 小份贮存于 -20 ℃

11 1mol/L 二硫苏糖醇( DTT )溶液

【配制方法】用 20ml 0.01mol/L 乙酸钠溶液( pH5.2 )溶解 3.09g DTT ,过滤除菌后分装成 1ml 小份贮存于 -20 ℃

【注意】 DTT 或含有 DTT 的溶液不能进行高压处理。

12 .脱氧核苷三磷酸( dNTP )溶液

【配制方法】把每一种 dNTP 溶解于水至浓度各为 100mmol/L 左右,用微量移液器吸取 0.05mol/l Tris 碱分别 调

每一 dNTP 溶液的 pH 7.0 (用 pH 试纸检测),把中和后的每种 dNTP 溶液各取一份作适当稀释,在给出的 波

长下读取光密度计算出每种 dNTP 的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为 50mmol/L dNTP ,分装成小份贮存于 -

70 ℃

13 0.5mol/l EDTA(pH8.0) 溶液

【配制方法】在 800ml 水中加入 186.1g 二水乙二胺四乙酸二钠( EDTA-Na?2H2O ),在磁力搅拌器上剧烈搅拌 ,

NaOH 调节 溶液的 pH 值至 8.0 (约需 20g NaOH 颗粒)然后定容至 1L ,分装后高压灭菌备用。

【注意】 EDTA 二钠盐需加入 NaOH 将溶液的 pH 值调至接近 8.0 ,才能完全溶解。

14 .溴化乙锭( 10mg/ml 溶液)

【配制方法】在 100ml 水中加入 1g 溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转

移至棕色瓶中,保存于室温。

【注意】小心:溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时

戴面罩。

15 2 × HEPES 缓冲盐溶液

【配制方法】用总量为 90ml 的蒸馏水溶解 1.6g NaCl 0.074g KCl 0.027g Na2PO4?2H2O 0.2g 葡聚糖和 1g HEPES

0.5mol/l NaOH 调节 pH 值至 7.05 ,再用蒸馏水定容至 100ml 。用 0.22 μ m 滤器过滤除菌,分装成 5ml 小份,贮

存于 -20 ℃

16 IPTG 溶液

【配制方法】 IPTG 为异丙基硫代 - β -D- 半乳糖苷(分子量为 238.3 ),在 8ml 蒸馏水中溶解 2g IPTG 后,用蒸馏

水定容至 10ml ,用 0.22 μ m 滤器过滤除菌,分装成 1ml 小份贮存于 -20 ℃

17 1mol/L 乙酸镁溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 214.46g 四水乙酸镁,用水定容至 1L 过滤除菌。

18 1mol/L MgCl2 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 203.4g MgCl2?6H2O ,用水定容至 1L ,分装成小份并高压灭菌备用。

【注意】 MgCl2 极易潮解,应选购小瓶(如 100g )试剂,启用新瓶后勿长期存放。

19 β - 巯基乙醇( BME )溶液

【配制方法】一般得到的是 14.4mol/L 溶液,应装在棕色瓶中保存于 4 ℃

【注意】 BME 或含有 BME 的溶液不能高压处理。

20 NBT 溶液

【配制方法】把 0.5g 氯化氮蓝四唑溶解于 10ml 70% 的二甲基甲酰胺中,保存于 4 ℃

21 .酚 / 氯仿溶液

【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用 0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6) 抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃 瓶

中,上面覆盖等体积的 0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6) 液层,保存于 4 ℃

【注意】酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服。所有操作均应在化学通

橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。