实验室常用贮存液的配制(3)

作者:李成文(原北京军事医学科学院主任)

实验室常用贮存液的配制(3)

22 10mmol/L 苯甲基磺酰氟( PMSF )溶液

【配制方法】用异丙醇溶解 PMSF 1.74mg/ml 10mmol/L ),分装成小份贮存于 -20 ℃ 。如有必要可配成浓度

高达 17.4mg/ml 的贮存液( 100mmol/L )。

【注意】 PMSF 严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或 皮

肤接触了 PMSF ,应立即用大量水冲洗之。凡被 PMSF 污染的衣物应予丢弃。 PMSF 在水溶液中不稳定。应在使用

前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。 PMSF 在水溶液中的活性丧失速率随 pH 值的升高而加快,且 25 ℃ 的失活

速率高于 4 ℃ pH 值为 8.0 时, 20 μ mmol/l PMSF 水溶液的半寿期大约为 85min ,这表明将 PMSF 溶液调节 为碱

性( pH>8.6 )并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

23 .磷酸盐缓冲溶液( PBS )溶液

【配制方法】在 800ml 蒸馏水中溶解 8g NaCl 0.2g KCl 1.44g Na2HPO4 0.24g KH2PO4, HCl 调节 溶 液

pH 值至 7.4 加水定容至 1L ,在 15lbf/in2(1034 × 105Pa) 高压下蒸气灭菌 20min 。保存于室温。

24 1mol/L 乙酸钾( pH7.5 )溶液

【配制方法】将 9.82g 乙酸钾溶解于 90ml 纯水中,用 2mol/L 乙酸调节 pH 值至 7.5 后加入纯水定容到 1L

保存于 -20 ℃

25 .乙酸钾溶液(用于碱裂解)

【配制方法】在 60ml 5mol/L 乙酸钾溶液中加入 11.5ml 冰乙酸和 28.5ml 水,即成钾浓度为 3mol/L 而乙酸根浓

度为 5mol/L 的溶液。

26 3mol/L 乙酸钠( pH5.2 pH7.0 )溶液

【配制方法】在 80ml 水中溶解 408.1g 三水乙酸钠,用冰乙酸调节 pH 值至 5.2 或用稀乙酸调节 pH 值至 7. 0

加水定容到 1L ,分装后高压灭菌。

27 5mol/L NaCl 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 292.2g NaCl 加水定容至 1L ,分装后高压灭菌。

28 10% 十二烷基硫酸钠( SDS )溶液

【配制方法】在 900ml 水中溶解 100g 电泳级 SDS ,加热至 68 ℃ 助溶,加入几滴浓盐酸调节 溶液的 pH 值至

7.2 ,加水定容至 1L ,分装备用。

【注意】 SDS 的微细晶粒易扩散,因此称量时要戴面罩,称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的 SD S

10%SDS 溶液无须灭菌。

29 20 × SSC 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 175.3g NaCl 88.2g 柠檬酸钠,加入数滴 10mol/l NaOH 溶液调节 pH 值至

7.0 ,加水定容至 1L ,分装后高压灭菌。

30 20 × SSPE 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 17.5g NaCl 27.6g NaH2PO4?H2O 7.4g EDTA ,用 NaOH 溶液调节 pH

7.4 (约需 6.5ml 10ml/L NaOH ),加水定容至 1L ,分装后高压灭菌。

31 100% 三氯乙酸溶液

【配制方法】在装有 500g TCA 的瓶中加入 227ml 水,形成的溶液含有 100% M/V TCA

32 1mol/L Tris 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 121.91g Tris 碱,加入浓 HCl 调节 pH 值至所需值。应使溶液冷至室温后方 可

最后调定 pH 值,加水定容至 1L ,分装后高压灭菌。

【注意】如 1mol/L 溶液呈现黄色,应予丢弃并置备质量更好的 Tris

尽管多种类型的电极均不能准确测量 Tris 溶液的 pH 值,但仍可向大多数厂商购得合适的电极。 Tris 溶液的 p H

值因温度而异,温度每升高 1 ℃ pH 值大约降低 0.03 个单位。例如: 0.05mol/L 的溶液在 5 ℃ 25 ℃ 、和 37 ℃ 时 的

pH 值分别为 9.5 8.9 8.6

33 Tris 缓冲盐溶液( TBS )( 25mmol/l Tris

【配制方法】在 800ml 蒸馏水中溶解 8g NaCl 0.2g KCl 3g Tris 碱,加入 0.015g 酚并用 HCl 调至 pH 值至 7 .4

用蒸馏水定容至 1L ,分装后在 151bf/in2(1.034 × 105Pa) 高压下蒸汽灭菌 20min ,于室温保存。

34 X-gal 溶液

【配制方法】 X-gal 5- -4- -3- 吲哚 - β -D 半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解 X-gal 配制成的 20mg/ml 的贮存液。

保存于一玻璃管或聚丙烯管中,装有 X-gal 溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于 -20 ℃

X-gal 溶液无须过滤除菌。